试验准备
材料准备:准备20%葡萄糖溶液1000mL(按特定方法配制)、0.9%生理盐水500mL 2瓶、留置针20G X 2、三通阀门4支、重力输液器2条、输液泵泵管1条、注射泵泵管1条、肝素抗凝剂20mL(按特定配方配制)、抗凝采血管10支、血糖检测试剂100支及新鲜定标液2支(系统液充足2ml)、10mL注射器60支、2mL注射器2支 。
仪器准备:热启动BIOSEN葡萄糖分析仪,更换定标液(按需添加系统液),完成定标和质控检查,确保仪器进入工作状态;启动胰岛素泵、葡萄糖输液泵;启动电脑进入CLAMP应用程序并输入基本数据。
受试者准备:受试者停用任何药物并空腹12H以上,次晨8时排空小便,测量身高、体重、腰臀围后清醒静卧。
静脉通路建立与基础标本采集:在受试者双臂远心端静脉放置留置针并用盐水维持通道,抽取病人血标本6mL,检测基础血糖浓度,剩余标本保存用于空腹血浆胰岛素等指标检测,之后缓速滴注生理盐水维持通路。
样本采集侧通路搭建:盐水滴注输液器末端连接3个三通,排气后连接至留置针,近心端三通接2mL注射器备用,下一个三通接10mL注射器备用,第三个三通预留备用。
葡萄糖泵准备:将葡萄糖泵输液器连接到20%葡萄糖输液瓶,打开通气阀排出空气后安装到输液泵,并安装好输液泵液滴探测器。
试验开始:在CLAMP应用程序中点击“试验开始”,系统给出输注速度窗口时,调整葡萄糖泵输注速度与之一致并开始注射,点击“确定”按钮继续试验。
样本采集与血糖检测及输注速度调整(第一阶段)
样本采集:每隔2分钟检测血糖和胰岛素、C肽等指标(随后每隔5分钟检测血糖)。采集时先关闭盐水滴注通道,将近心端第二个三通与10mL注射器导通抽取3mL稀释血液,将近心端第一个三通与2mL注射器导通并与10mL注射器隔离抽取0.5mL样本检测血糖,弃去10mL注射器中的稀释样本,再导通所有三通继续缓速滴注盐水。
输注速度调整:系统接收到血糖测试结果后自动弹出输注速度窗口,确认血糖检测结果后点击“确认”按钮计算输注速度,重复该操作。
样本采集(第二阶段):进入第二相后每隔20分钟抽取血样本检测C肽、胰岛素等指标,重复此步骤直至试验结束。
试验后观察:对于某些胰岛功能强大的受试者,试验后应继续观察血糖水平30分钟以上 。
需注意,根据不同试验要求和目的,流程和方法可能不同,操作者应按需调整